domingo, 29 de diciembre de 2019

Terapia Regenerativa con Stem Cells en la Influenza



Las células madre distales que expresan p63 (+) Krt5 (+) son esenciales para la regeneración pulmonar en respuesta al daño pulmonar inducido por la influenza.

Tipo de Stem Cells:
Somática: células madre distales de las vías respiratorias (DASC p63 / Krt5 y TBSC p63 / Krt5)
Método de Obtención:
  • Aislar las células madre de las vías respiratorias, se recogieron de la tráquea (TBSCs) y del pulmón (DASCs) de ratones adultos y se sumergieron en tampón de lavado en frío (medio F12, 1% Pen / Strep, 5% FBS).
  • Se digiere con tampón de disociación (F12 / DMEM, 1mg de proteasa ml, 0,005% de tripsina y 10 ng ml21 de ADNasa I)
  • Las células disociadas se cultivaron en células alimentadoras 3T3 irradiadas
  • Las colonias de células individuales fueron recogidas mediante anillos de clonación.
  • Células de TBSCs y DASCs diferenciados in vitro
  • Para activar los genes (lacZ) en TBSCs y DASCs clonados se expuso las colonias in vitro a 4-OH-tamoxifeno
  • Trasplante de células madre en el pulmón en ratones adultos

Resultados:
A corto plazo se logró generar colonias de células madre distales de las vías respiratorias con autorenovación a partir de tres ratones de 0 dpi
A medio plazo se espera propagar la capacidad de estas células manteniendo su compromiso de linaje intrínseco trabajando con células humanas.
A largo plazo se proyecta terapias basadas en células madre para enfermedades pulmonares agudas y crónicas.

BIBLIOGRAFÍA:

Zuo WZhang T, Wu DZGuan SPLiew AA i, p63(+)Krt5(+) distal airway stem cells are essential for lung regeneration.






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