Terapia Regenerativa con Stem Cells en la Influenza

Terapia Regenerativa con Stem Cells en la Influenza

Las células madre distales que expresan p63 (+) Krt5 (+) son esenciales para la regeneración pulmonar en respuesta al daño pulmonar inducido por la influenza.

Tipo de Stem Cells:

Somática: células madre distales de las vías respiratorias (DASC p63 / Krt5 y TBSC p63 / Krt5)

Método de Obtención:

• Aislar las células madre de las vías respiratorias, se recogieron de la tráquea (TBSCs) y del pulmón (DASCs) de ratones adultos y se sumergieron en tampón de lavado en frío (medio F12, 1% Pen / Strep, 5% FBS).
• Se digiere con tampón de disociación (F12 / DMEM, 1mg de proteasa ml, 0,005% de tripsina y 10 ng ml21 de ADNasa I)
• Las células disociadas se cultivaron en células alimentadoras 3T3 irradiadas
• Las colonias de células individuales fueron recogidas mediante anillos de clonación.
• Células de TBSCs y DASCs diferenciados in vitro
• Para activar los genes (lacZ) en TBSCs y DASCs clonados se expuso las colonias in vitro a 4-OH-tamoxifeno
• Trasplante de células madre en el pulmón en ratones adultos

Resultados:

A corto plazo se logró generar colonias de células madre distales de las vías respiratorias con autorenovación a partir de tres ratones de 0 dpi

A medio plazo se espera propagar la capacidad de estas células manteniendo su compromiso de linaje intrínseco trabajando con células humanas.

A largo plazo se proyecta terapias basadas en células madre para enfermedades pulmonares agudas y crónicas.

BIBLIOGRAFÍA:

Zuo W, Zhang T, Wu DZ, Guan SP, Liew AA i, p63(+)Krt5(+) distal airway stem cells are essential for lung regeneration.

, [Internet]. Nature.com. 2016 [cited 29 December 2019]. Available from https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/?term=Distal+stem+cells+expressing+p63+(%2B)+Krt5+(%2B)+are+essential+for+lung+regeneration

Transgénico para Neumonía por virus de la Influenza

Los pollos transgénicos que expresan la proteína de fragmento variable de cadena única 3D8 suprimen la transmisión de la influenza aviar.

Se realizó modificaciones genéticas para controlar la IA en aves de corral, mediante la introducción de un gen personalizado para una mayor afinidad por las nucleoproteínas de la IA. Generando una una línea de animales transgenicos que expresan un gen. Los embriones de pollo knock-in se microinyectaron con un vector lentiviral scFv-HA-IRES para generar pollos transgénicos, gen scFv 3D8 bajo el control del promotor de la β-actina de pollo.

Uso:

El experimento de desafío reveló que los pollos transgénicos expuestos al contacto que expresaban scFv 3D8 exhibían una eliminación viral suprimida. Estos resultados sugieren que los pollos transgénicos desarrollados en este estudio podrían ser útiles para controlar la posible transmisión de AIV dentro de la bandada.

Análisis de transferencia Southern de los pollos transgénicos. Se extrajeron muestras de ADN genómico de muestras de sangre completa de pollos de tipo salvaje y transgénicos (G1 y G2), se digirieron con EcoRV, se sometieron a electroforesis

5 Ventajas y 5 Desventajas de los Transgénicos.

VENTAJAS	DESVENTAJAS
1.        Control de vectores	1.       Reducción de eficiencia en antibióticos
2.       Creación de fármacos y vacunas	2.       Alergias, intolerancias y enfermedades autoinmunes
3.       Alimentos con mayor carga nutritiva	3.       Invasión de ecosistemas
Desarrollo de biomodelos para evaluación de nuevas terapias y patogenia de enfermedades	4.       A largo plazo las plagas generan resistencia
5.       Mayor resistencia a los insectos	5.       Modificación genética de virus dando lugar a nuevas enfermedades

BIBLIOGRAFIA:

 Byun S , Yuk S , Jang Y , Choi J , Jeon K , Pollos transgénicos que expresan la proteína del fragmento variable de cadena sencilla 3D8 suprimen la transmisión de la gripe aviar [Internet]. Nature.com. 2017 [cited 18 December 2019]. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5517518/

Wang S, Chen C, Yang Z, Chi X, Zhang  J, Chen Ji, Targeted disruption of influenza A virus hemagglutinin in genetically modified mice reduces viral replication and improves disease outcome, [Internet]. Nature.com. 2016 [cited 18 December 2019]. Available from: https://www.nature.com/articles/srep23746

Reyes M, Rozowski J, Alimentos transgénicos, [Internet].scielo. 2016 [cited 18 December 2019]. Available from:  https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-75182003000100003

La producción de "VACUNAS RECOMBINANTES CONTRA LA INFLUENZA", como el FLUBLOK   que se da mediante la extracción de células del gusano cogollero del maíz alterando la producción de HA, que es la proteína más inmunogénica, capaz de originar una respuesta protectora contra la influenza, luego, esa proteína se expresa en un sistema heterólogo, donde el insecto manifestando el gen que pertenece al virus. con el  ADN recombinante ya no es necesario manejar el virus de la influenza vivo.

BIBLIOGRAFÍA:

1. Griffiths A, Miller J, Suzuki D, Lewontin R, Gelbart W. Transduction [Internet]. Ncbi.nlm.nih.gov. 2019 [cited 14 December 2019]. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK21760/?redirect-on-error=__HOME__
2. Los CDC confirman un 6° y 7° caso de virus de la influenza A H3N2 de origen porcino con el gen M del virus H1N1 2009 [Internet]. Centros para el Control y la Prevención de Enfermedades, Centro Nacional de Vacunación y Enfermedades. 2011 [cited 10 December 2019]. Available from: https://espanol.cdc.gov/enes/flu/spotlights/swine-origin-indiana.htm
3.  Intención de recibir la vacuna monovalente contra la influenza A (H1N1) 2009 y la vacuna contra la influenza estacional --- Dos condados, Carolina del Norte, agosto de 2017 [Internet]. Cdc.gov. 2017 [cited 14 December 2019]. Available from: https://www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm5850a1_ensp.htm
4. Palomares L. UNAM-IBT. Dra. Laura Palomares. LAMMB. Vacunas Recombinantes [Internet]. Youtube.com. 2018 [cited 14 December 2019]. Available from: https://www.youtube.com/watch?v=nrLChKIcQA0&feature=youtu.be

Recombinación de ácidos nucléicos que suceden en la naturaleza (sin que haya intervenido la manipulación humana)

ADN recombinante permite introducir en el ADN de un organismo un fragmento de interés procedente de otro organismo donante. Permitiéndonos identificar genes y productos que median la inmunidad y resistencia a medicamentos, transferidos por genes o formas mutadas de los genes en agentes causales o huéspedes sustitutos, por fásmidas lanzadera, moléculas quiméricas que se replican en E. coli como plásmidos y en micobacterias como micobacteriófagos, actúa en el desarrollo de sistemas de transferencia génica

BIBLIOGRAFÍA:

1. Ping X e. Generation of a broadly reactive influenza H1 antigen using a consensus HA sequence. - PubMed - NCBI [Internet]. Ncbi.nlm.nih.gov. 2019 [cited 5 December 2019]. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29960799
2. Jacobs W. Transferencia génica en Mycobacterium tuberculosis : Phasmids del transbordador a la iluminación [Internet].  cbi.nlm.nih.gov. 2014 [citado 5 Diciembre 2019]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4725585/