Técnica de Edición Epigenómica

Existen fármacos que están aún en estudio y se basan en modificaciones epigenómicas. A pesar de numerosos estudios, muchos aspectos asociados con la transcripción y la replicación del genoma viral permanecen sin explorar. El conocimiento fundamental sobre estos temas es necesario para mejorar la eficacia de la vacuna, el descubrimiento de fármacos antivirales y las herramientas de diagnóstico para protegerse de una nueva pandemia grave provocada por una influenza patógena.IAV es un virus de ARN monocatenario de sentido negativo.

·         Tema: Dirigirse al entorno de la cromatina de la transcriptasa del virus de la gripe para interferir con el ciclo del virus - FluChromatin.

• Mecanismo epigenómico tratado: metilación de Histonas
  
  
• Cómo se lo hizo:  la maquinaria de transcriptasa del virus de la Influenza A (IAV) se dirige a la cromatina, para explorar el impacto global del virus en la estructura de la cromatina del huésped
  
  
• Resultados: Permitió obtener información preliminar sobre el efecto de una selección de Epi-fármacos en el ciclo viral

BIBLIOGRAFÍA:

Delmas M. Targeting the chromatin environment of the influenza virus transcriptase to interfere with the virus cycle | ANR [Internet]. Agence nationale de la recherche. 2017 [cited 11 January 2020]. Available from: https://anr.fr/Project-ANR-17-CE18-0006

Ejemplo de Técnicas de Edición de Ácidos Nucleicos

El virus de la gripe A facilita su infectividad al activar p53 para inhibir la expresión de proteínas transmembrana inducidas por interferón

En este estudio revelan que la activación de p53 por el virus de la influenza A es un paso esencial para mantener su infectividad, de modo que si se inactiva p53 mediante técnicas de edición genómica como CRISPR/Cas9, aumenta la expresión de proteínas transmembrana inducidas por IFITM y por tanto se bloquea la entrada del virus de la gripe a las células.  

Tema: El virus de la gripe A facilita su infectividad al activar p53 para inhibir la expresión de proteínas transmembrana inducidas por interferón, esto se puede modificar mediante técnicas de edición genómica

Tipo EG: Somática ex vivo (in vitro)

Dirigida a: Modificaciones de ADN en el locus TP53 de células pulmonares A549

Dirigido por: Tecnología CRISPR/Cas9 – p53 knochout se diseñaron secuencias de RNA mono guía (sgRNA) dirigidas a P53.

Órgano/ sistema/ tejido/ célula:

Pulmón: Células pulmonares susceptibles al virus influenza

Vía de administración: No se realizó administración in vivo. El procedimiento se realizó únicamente ex vivo a través del cual las células A 549 se transfectaron con las secuencias sgRNA usando reactivo Lipofectamine 2000.

Resultados:

Corto plazo: Usando células humanas p53 de tipo natural se generó células p53 null mediante CRISPR/ Cas9, cuyo estudio determinó que las ultimas muestran una propagación viral reducida.

Medio plazo: Se debería realizar estudios posteriores, utilizando además de la técnica ex vivo también técnicas in vivo.

Largo Plazo: Determinar cuáles son los efectos secundarios que podrían producirse.

BIBLIOGRAFÍA:

Bei W, Tze H,  Mun K, Zhiyong Y, Jinmiao C, y Ee Chee R, El virus de la influenza A facilita su infectividad activando p53 para inhibir la expresión de proteínas transmembrana inducidas por interferón [Internet]. pubmed.com. 2018 [cited 04 enero 2020]. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5990591/