Biología Molecular

T: Reverse transcription recombinase polymerase amplification with lateral flow dipsticks for detection of influenza A virus and subtyping of H1 and H3.

O: Identificar correctamente el virus de la influenza A H1N1 mediante el PCR en tiempo real, para así mejorar en el diagnóstico temprano y dar un tratamiento adecuado.

M: Exudados faríngeos usando hisopos Virocult

ADN: ADNc (Complementario) y ARN viral

G:  H1 Y H3

Ex:

Lisis: ácido nucleico viral se extrajo de 140 ul de medio de transporte viral
Separación: químico: usando 50 ul de tapón de elución utilizando el virus TIANamp ADN ARN Kit

 

PCR: PCR en tiempo real.

	T°	TIEMPO	CICLOS
Desnaturalización	95 ° C	30 s	30 ciclos
Hibridación	72 ° C	30 s	30 ciclos
Elongación	72 ° C	30 s	30 ciclos

 

V: Electroforesis

Sensibilidad: 5%, 93.33% y 71.43% para la matriz, H1 y H3

Especificidad:  100%

BIBLIOGRAFÍA:

1. Sun, N., Wang, W., Wang, J., Yao, X., Chen, F., Li, X., … Chen, B. (2018). Reverse transcription recombinase polymerase amplification with lateral flow dipsticks for detection of influenza A virus and subtyping of H1 and H3. Molecular and Cellular Probes, [Internet]. [Publicado diciembre 2018; citado 17 noviembre 2019]. Disponible en: http://sci-hub.tw/10.1016/j.mcp.2018.10.004#